4Pi STED顕微鏡

4Pi-STED顕微鏡は誘導放出抑制(STED)顕微鏡4Pi顕微鏡という2つの無関係な概念を組み合わせたものです。ここでは、蛍光サンプルを2つの対向レンズの共通焦点に配置しますが、励起検出は1つのレンズ(4PiモードA)を介して行われます。緑色の励起パルスの直後に赤色のSTEDパルスが続き、このパルスは両方のレンズを通過して焦点領域に入り、励起された蛍光分子の基底状態への誘導放出を引き起こします。中心からの蛍光放出を許容しながら、隣接領域からの蛍光放出を抑制するには、STEDビームの位相をシフトして中心で最小値になるようにすること が有効です。