クームズテスト
免疫血液学で使用される血液検査
医療診断検査
クームズテスト
MeSHD003298
メドラインプラス003344

直接クームス試験と間接クームス試験は、抗グロブリン試験（AGT）としても知られ、免疫血液学で使用される血液検査です。直接クームス試験は、赤血球の表面に付着した抗体を検出します。[1]これらの抗体は赤血球を破壊することがあるため、貧血を引き起こす可能性があります。この検査は、貧血の状態を明らかにするのに役立ちます。間接クームス試験は、血液中に自由に浮遊している抗体を検出します。[1]これらの抗体は特定の赤血球に対して作用する可能性があります。この検査は、輸血に対する反応を診断するために行うことができます。[1]

直接クームス試験は、自己免疫性溶血性貧血（免疫系が赤血球を破壊し、貧血を引き起こす状態）の検査に用いられます。この試験では、赤血球の表面に付着した抗体または補体タンパク質を検出します。検査では、まず血液サンプルを採取し、赤血球を洗浄（患者の血漿と赤血球に結合していない抗体を除去）した後、抗ヒトグロブリン（「クームス試薬」）と反応させます。その後、赤血球が凝集すれば検査は陽性となり、抗体または補体タンパク質が赤血球の表面に結合し、赤血球の破壊を引き起こしている可能性があることが視覚的に示されます。

間接クームス試験は、妊婦の出生前検査や輸血前の検査に用いられます。この検査は、異物である赤血球に対する抗体を検出します。この検査では、患者から採取した血液サンプルから血清を抽出します。この血清を、抗原性が既知の異物である赤血球とインキュベートします。最後に、抗ヒトグロブリンを添加します。凝集反応が認められた場合、間接クームス試験は陽性となります。[2]

メカニズム

直接クームス試験と間接クームス試験を示す模式図

2つのクームス試験は、抗ヒト抗体がヒト抗体（一般的にIgGまたはIgM）に結合することに基づいています。これらの抗ヒト抗体は、ヒト血漿で免疫された非ヒト動物の形質細胞によって産生されます。さらに、これらの抗ヒト抗体は、赤血球（RBC）表面の抗原に固定されている可能性のあるヒト抗体にも結合します。適切な試験管条件下では、赤血球の凝集が起こり、結果として生じる赤血球の塊を視覚化することができます。凝集が見られればクームス試験は陽性であり、見られなければクームス試験は陰性です。[3]

クームス試験の一般的な臨床用途としては、交差適合試験における輸血用血液の準備、出産前ケアの一環として妊婦の血漿中の非定型抗体の検出、免疫介在性溶血性貧血の診断のための抗体の検出などがある。[4]

クームス試験は、患者から静脈穿刺によって採取された静​​脈血サンプルから、赤血球または血清（それぞれ直接または間接）を用いて行われます。静脈血は検査室（または血液バンク）に運ばれ、そこで訓練を受けた科学技術スタッフがクームス試験を実施します。結果の臨床的意義は、クームス​​試験を依頼した医師が、場合によっては検査室に所属する血液専門医の支援を受けて評価します。[要出典]

直接クームス試験

直接クームス試験は、直接抗グロブリン試験（DAT）とも呼ばれ、抗体または補体系因子が赤血球表面抗原に結合しているかどうかを検出するために使用されます。[5] DATは輸血前検査に必須ではありませんが[6]、一部の検査室で実施される場合があります。[説明が必要]輸血前には、間接クームス試験が行われることがよくあります

用途

DAT陽性の主な診断アルゴリズム[7]

直接クームス試験は、免疫介在性溶血性貧血（抗体を介した赤血球の破壊）が疑われる場合に臨床的に使用されます。クームス試験陽性は、免疫機構が患者の赤血球を攻撃していることを示します。この機構は、自己免疫、同種免疫、または薬剤誘発性の免疫介在機構である可能性があります。 [3]

同種免疫溶血の例

自己免疫溶血/免疫溶血性溶血の例

薬剤誘発性免疫介在性溶血

( DATは赤血球を検査し、新生児の溶血性疾患の検査に使用されることを覚えておくための記憶装置は、 R h Disease、R = 赤血球、D = DAT です。)

検査室

患者の赤血球を洗浄（患者自身の血清を除去）し、抗ヒトグロブリン（クームス試薬とも呼ばれる）とともに遠心分離します。体外で赤血球表面に免疫グロブリンまたは補体因子が固定されている場合、抗ヒトグロブリンは赤血球を凝集させ、直接クームス試験は陽性となります。（直接クームス試験陽性の視覚的表現を図式の上半分に示します。）[要出典]

間接クームス試験

間接クームス試験は、間接抗グロブリン試験（IAT）とも呼ばれ、体外抗原抗体反応を検出するために使用されます。輸血前の患者の血漿／血清中に存在する非常に低濃度の抗体を検出するために使用されます。出産前ケアでは、IATは妊婦の新生児溶血性疾患を引き起こす可能性のある抗体をスクリーニングするために使用されます。IATは、適合性試験、抗体同定、赤血球表現型検査、および滴定試験にも使用できます。 [要出典]

用途

輸血用血液製剤

間接クームス試験は、輸血用血液の調製における抗体検査に用いられます。供血者と受血者の血液はABO式およびRhD式に適合していなければなりません。輸血用供血者の血液は、別の工程で感染症検査も行われます。[要出典]

  • 抗体スクリーニング

受血者からの血液サンプルと、ドナー血液1単位ごとの血液サンプルを、間接クームス試験で抗体の有無についてスクリーニングします。各サンプルは、幅広い種類の赤血球に対して培養されます。これらの赤血球は、様々な表面抗原（つまり、血液型） を呈します

  • 交差適合試験

間接クームス試験は、受血者の血清サンプル中の、献血者の赤血球サンプルに対する抗体の有無を調べるために使用されます。これは交差適合試験血液 と呼ばれることもあります

出生前抗体スクリーニング

間接クームス試験は、胎盤を通過して胎児の血液に入り、新生児の溶血性疾患を引き起こす可能性のあるIgG 抗体を妊婦から検査するために使用されます。[引用が必要]

実験室法

IATは2段階の検査です。（図の下半分には、間接クームス試験の例として交差試験が視覚的に示されています。）[要出典]

第一段階

既知の抗原を含む患者以外の洗浄赤血球（RBC）を、抗体含有量が不明な患者血清とインキュベートします。血清に赤血球表面の抗原に対する抗体が含まれている場合、抗体は赤血球表面に結合します。[要出典]

第二段階

赤血球は等張食塩水で3～4回洗浄され、抗ヒトグロブリンと共にインキュベートされます。第一段階で抗体が赤血球表面抗原に結合している場合、この段階で抗ヒトグロブリン（クームス試薬とも呼ばれます）と共にインキュベートすると赤血球は凝集し、間接クームス試験は陽性となります

滴定

抗体を含む血清を希釈することで、血清中の抗体の量を測定することができます。これは、血清を段階希釈し、関連する赤血球の凝集を引き起こすことができる試験血清の最大希釈度を見つけることによって行われます。[要出典]

クームス試薬

クームス試薬（クームス抗グロブリンまたは抗ヒトグロブリンとも呼ばれる）は、直接クームス試験と間接クームス試験の両方に使用されます。この試薬は、ヒトグロブリンを動物に注射することで製造され、ヒト免疫グロブリンとヒト補体系因子に特異的なポリクローナル抗体が生成されます。より特異的なクームス試薬またはモノクローナル抗体を使用することもできます。[要出典]

強化メディア

IgM抗体とIgG 抗体はどちらも、それぞれの相補抗原と強力に結合します。IgG抗体は 37 °C で最も反応性が高くなります。IgM 抗体はサイズが大きいため赤血球間を橋渡しして凝集とみなされる反応を効率的に起こすことができるため、室温の生理食塩水中で簡単に検出されます。IgG 抗体はサイズが小さいため、視覚的な凝集反応を形成できるほど十分に橋渡しするには支援が必要です。IgG 検出を強化するために使用される試薬は、増強剤と呼ばれます。赤血球は、ゼータ電位と呼ばれる正味の負電荷を持ち、それによって赤血球は互いに自然に反発します。増強剤は、赤血球膜のゼータ電位を低下させます。一般的な増強剤には、低イオン強度溶液 (LISS)、アルブミン、ポリエチレングリコール(PEG)、およびタンパク質分解酵素などがあります。

歴史

クームス試験は、1945年にケンブリッジ大学の 免疫学者 ロビン・クームス（試験名の由来）、アーサー・モーラント、ロブ・レースによって初めて報告されました。[8]歴史的には試験管内で行われていました。今日では、自動化された固相法またはゲル法を用いて行われるのが一般的です

参考文献

  1. ^ abc 「クームス試験：MedlinePlus医療百科事典」medlineplus.gov。2019年5月6日閲覧
  2. ^ F. RosenとR. Geha、「免疫学のケーススタディ」、第4版、Garland Science、p.173。
  3. ^ ab Zantek, Nicole D.; Koepsell, Scott A. (2012-04-12). 「直接抗グロブリン試験：溶血の評価における重要なステップ」American Journal of Hematology . 87 (7): 707– 709. doi : 10.1002/ajh.23218 . PMID  22566278.
  4. ^ Theiss, Samuel R. (2023). クームズ検定. StatPearls Publishing LLC. PMID  31613487.
  5. ^ Reid ME, Lomas-Francis C (2015年12月23日). 「第136章 赤血球の抗原と抗体」. Williams hematology (第9版). ニューヨーク: McGraw-Hill. ISBN 9780071833004 OCLC  913870019
  6. ^ 「13.3：輸血前検査」英国（UK）血液輸血・組織移植サービス合同専門諮問委員会。2023年10月4日
  7. ^ Michael Häggstrom医師による画像。条件のソース: Joe Chaffin (2017-02-27)。 「028: Who DAT? with スー・ジョンソン」引用元: C Feldman & J O'Connor。
  8. ^ Coombs, RR; Mourant, AE; Race, RR (1945). 「弱凝集素および不完全Rh凝集素の検出のための新しい検査法」. British Journal of Experimental Pathology . 26 (4): 255–66 . PMC 2065689. PMID  21006651 . 
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