シングルドメイン抗体
ラマのV H Hドメインのリボン図。延長されたCDR3ループはオレンジ色で示されている。

単一ドメイン抗体（sdAb ）はナノボディとも呼ばれ、単一のモノマー可変抗体ドメインからなる抗体フラグメントである。抗体全体と同様に、特定の抗原に選択的に結合することができる。分子量がわずか12～15 kDaの単一ドメイン抗体（sdAb）は、2つの重タンパク質鎖と2つの軽鎖からなる一般的な抗体（150～160 kDa）よりもはるかに小さく、Fabフラグメント（約50 kDa、1つの軽鎖と半分の重鎖）や単一鎖可変フラグメント（約25 kDa、2つの可変ドメイン、1つは軽鎖から、もう1つは重鎖から）よりもさらに小さい。[ 1 ]

最初のシングルドメイン抗体は、ブリュッセル自由大学でラクダ科動物から発見された重鎖抗体から作製されました。これらはV ​​H Hフラグメントと呼ばれています。軟骨魚類にも重鎖抗体（IgNAR、「免疫グロブリン新抗原受容体」）があり、そこからV NARフラグメントと呼ばれるシングルドメイン抗体が得られます。[ 2 ]別のアプローチとして、ヒトまたはマウスの一般的な免疫グロブリンG （IgG）から二量体可変ドメインを単量体に分割する方法があります。現在、シングルドメイン抗体の研究のほとんどは重鎖可変ドメインに基づいていますが、軽鎖由来のナノボディも標的エピトープに特異的に結合することが示されている。[ 3 ]

ラクダ科動物のナノボディは抗体と同等の特異性を示し、場合によっては抗体よりも堅牢性が高いことが示されています。抗体と同じファージパンニング法を用いて容易に単離できるため、高濃度でin vitro培養が可能です。サイズが小さくドメインが単一であるため、これらの抗体は細菌細胞への形質転換が容易で、大量生産が可能であり、研究目的に最適です。[ 4 ]

シングルドメイン抗体は、複数の医薬品への応用について研究されており、急性冠症候群、癌、アルツハイマー病[ 5 ] [ 6 ]、COVID-19の治療に使用できる可能性があります。[ 7 ] [ 8 ] [ 9 ]

プロパティ

シングルドメイン抗体は、約 110 個のアミノ酸からなるペプチド鎖で、重鎖抗体または一般的な IgG の 1 つの可変ドメイン (V H ) で構成されています。これらのペプチドは、全抗体と同様の抗原親和性がありますが、耐熱性が高く、洗剤や高濃度の尿素に対して安定しています。ラクダ科動物や魚類の抗体に由来するものは、通常軽鎖に結合する親油性部位を覆う拡張ループ (上記のリボンの図でオレンジ色) を形成する相補性決定領域 3 (CDR3) により、親油性が低く、水への溶解性が高くなっています。[ 10 ] [ 11 ]一般的な抗体とは対照的に、1999 年の研究では、6 つのシングルドメイン抗体のうち 2 つが 90 °C (194 °F) の温度に耐え、抗原に結合する能力を失いませんでした。[ 12 ]いくつかの種は経口投与後に腸内で活性を示すことが示されているが[ 13 ] [ 14 ] 、腸からの吸収が低いため、経口投与された全身活性の単一ドメイン抗体の開発が妨げられている。

単一ドメイン抗体とタンパク質抗原の複合体は、埋もれた結合部位を明らかにする。[ 15 ]（左）リゾチーム（PDB 1T6V）と複合体を形成したコモリザメV NAR単一ドメイン。（右）リゾチーム（PDB 2EIZ）と複合体を形成したヒト化HyHEL-10 Fv

比較的低い分子量のため、組織透過性は良好ですが、腎排泄のため血漿半減期は短くなります。[ 1 ]完全抗体とは異なり、 Fc領域がないため、補体系による細胞傷害活性は示しません。ラクダ科動物や魚類由来のsdAbは、完全抗体ではアクセスできない隠れた抗原、例えば酵素の活性部位に結合することができます。[ 15 ]この特性は、そのような隠れた部位に浸透できる拡張CDR3ループに起因することが示されている。[ 11 ] [ 16 ] [ 15 ]

生産

サメ（左）とラクダ科（中央）の重鎖抗体と一般的な抗体（右）の比較。重鎖は濃い色で、軽鎖は薄い色で示されている。V HとV Lは可変ドメインである。

重鎖抗体から

単一ドメイン抗体は、ヒトコブラクダ、ラクダ、ラマ、アルパカ、サメを目的の抗原で免疫し、続いて重鎖抗体の可変領域（V NARおよびV H H）をコードするmRNAを単離することによって得ることができる。大きなファージディスプレイV NARおよびV H H単一ドメインライブラリは、コモリザメ[ 17 ]およびヒトコブラクダ[9]から確立されている。[ 18 ]ファージディスプレイやリボソームディスプレイなどのスクリーニング技術は、抗原に結合するクローンを同定するのに役立ちます。[ 19 ] [ 17 ] [ 20 ] [ 9 ] [ 21 ] [ 8 ] [ 18 ] V NARを含む単一ドメイン抗体は、臨床応用のためにヒト化することができます。[ 22 ]

従来の抗体から

あるいは、シングルドメイン抗体は、4つの鎖を持つ一般的なマウスIgG [ 23 ]、ウサギIgG [ 24 ]、またはヒトIgG [ 25 ]から作成できます。 [ 26 ]プロセスは似ており、免疫化されたドナーまたは未処置のドナーからの遺伝子ライブラリーと、最も特異的な抗原を識別するためのディスプレイ技術で構成されています。このアプローチの問題点は、一般的なIgGの結合領域が2つのドメイン（V HとV L）で構成されており、これらのドメインが親油性のために二量体化または凝集する傾向があることです。モノマー化は通常、親油性アミノ酸を親水性アミノ酸に置き換えることによって達成されますが、抗原に対する親和性が失われることがよくあります。[ 27 ]親和性を維持できれば、シングルドメイン抗体は大腸菌[ 24 ] [ 25 ] [ 28 ] S. cerevisiaeなどの生物 でも同様に生成できます。

ヒト単一ドメイン抗体から

ヒトは、軽鎖に終止コドンをランダムに生成することで、単一ドメイン抗体を産生することがあります。メソテリン[ 28 ] 、 GPC2 [ 29 ]、GPC3 [ 25 ] [ 30 ]など、様々な腫瘍抗原を標的とするヒト単一ドメイン抗体がファージディスプレイ法によって単離されました。HN3ヒト単一ドメイン抗体は、肝癌治療のための免疫毒素[ 30 ] [ 31 ] [ 32 ]やキメラ抗原受容体（CAR）T細胞[ 33 ]の作成に使用されています。HN3ヒト単一ドメイン抗体によってGPC3のWnt結合ドメインを阻害すると、肝癌細胞におけるWnt活性化が阻害されます[ 34 ] 。

潜在的な用途

シングルドメイン抗体は、その小さなサイズ、簡単な製造、高い親和性により、バイオテクノロジーおよび治療用途において幅広い応用が可能です。[ 35 ] [ 36 ] [ 15 ]

バイオテクノロジーおよび診断

蛍光タンパク質をナノボディに融合すると、いわゆるクロモボディが生成されます。クロモボディは、生細胞のさまざまな区画にある標的を認識し追跡するために使用できます。そのため、生細胞顕微鏡検査の可能性を高め、新しい機能研究が可能になります。[ 37 ]抗GFPナノボディをGFPナノトラップと呼ばれる一価マトリックスに結合させると、GFP融合タンパク質とその相互作用パートナーを単離し、さらなる生化学分析を行うことができます。[ 38 ]超解像イメージング技術による単一分子の局在化には、標的タンパク質のすぐ近くに蛍光色素を特異的に送達する必要があります。蛍光色素はサイズが大きいため、有機色素に結合した抗体を使用すると、蛍光色素と標的タンパク質との距離が原因で、誤った信号が生じることがよくあります。GFPタグ付きタンパク質を標的とする抗GFPナノボディに有機色素を融合すると、サイズが小さく親和性が高いため、ナノメートルの空間分解能と最小限の結合エラーが可能になります。[ 39 ]ナノボディのサイズ配当は、相関光電子顕微鏡研究にも有益です。透過処理剤を一切使用せずに、化学的に固定された細胞の細胞質は、蛍光標識ナノボディによって容易にアクセス可能です。また、ナノボディはサイズが小さいため、通常の抗体よりも体積サンプルのより深くまで浸透することができます。蛍光顕微鏡と電子顕微鏡で画像化された組織において、高い超微細構造品質が維持されます。これは、分子標識と電子顕微鏡画像の両方を必要とする神経科学研究に特に有用です。[ 40 ]

診断バイオセンサー用途において、ナノボディは将来的にツールとして利用できる可能性があります。ナノボディはサイズが小さいため、バイオセンサー表面に高密度に結合できます。アクセスしにくいエピトープを標的とする利点に加え、ナノボディの立体構造安定性は、表面再生条件に対する高い耐性にもつながります。ヒト前立腺特異抗原（hPSA）を感知するセンサー表面に単一ドメイン抗体を固定化し、試験を行いました。その結果、ナノボディは臨床的に有意な濃度のhPSAを検出する際に、従来の抗体よりも優れた性能を示しました。[ 41 ]

標的分子の結晶化確率を高めるために、ナノボディは結晶化シャペロンとして用いることができる。補助タンパク質として、ナノボディは特定のコンフォメーション状態にのみ結合し安定化させることで、コンフォメーションの不均一性を低減することができる。また、結晶化を妨げる表面を覆い、結晶接触領域を拡大することもできる。[ 42 ] [ 36 ]

治療的

光熱療法用ナノボディ。HER2などの腫瘍抗原に結合できるナノボディは、光エネルギーを吸収して熱を発生させ、癌細胞を死滅させる分岐金ナノ粒子と結合しています。

シングルドメイン抗体は、複数の標的に対する新たな治療ツールとして試験されています。インフルエンザAウイルス亜型H5N1に感染したマウスにおいて、ヘマグルチニンを標的としたナノボディは、生体内でH5N1ウイルスの複製を抑制し、罹患率と死亡率を低下させました。[ 43 ]クロストリディオイデス・ディフィシルの毒性因子である毒素Aおよび毒素Bの細胞受容体結合ドメインを標的とするナノボディは、 in vitroで線維芽細胞における細胞変性効果を中和することが示されました。[ 44 ]抗原提示細胞を認識するナノボディ複合体は、腫瘍検出[ 45 ]や強力な免疫応答を生成するための標的抗原送達に効果的に使用されています。[ 46 ]

子豚の大腸菌誘発性下痢に対する経口投与可能な単一ドメイン抗体が開発され、試験に成功している。[ 14 ]炎症性腸疾患や大腸癌などの消化管の他の疾患も、経口投与可能な単一ドメイン抗体の標的となり得る。[ 47 ]

マラセチア・フルフルの表面タンパク質を標的とした洗剤安定性のある種が、フケ防止シャンプーに使用するために設計されている。[ 10 ]

光熱療法のアプローチとして、乳がん細胞および卵巣がん細胞で過剰発現しているHER2抗原に結合するナノボディを分岐金ナノ粒子に結合させた（図参照）。試験環境において、レーザーを用いて腫瘍細胞を光熱的に破壊した。[ 48 ]

フォン・ヴィレブランド因子を標的とした単一ドメイン抗体であるカプラシズマブは、急性冠症候群患者の血栓症予防を目的とした臨床試験が行われている。 [ 49 ] ALX-0081を高リスク経皮的冠動脈介入で検討する第II相試験は2009年9月に開始された。[ 50 ]

アブリンクス社は、ナノボディが血液脳関門を通過し、抗体全体よりも容易に大きな固形腫瘍に浸透し、脳腫瘍に対する薬の開発を可能にすると期待している。[ 47 ]

ベータコロナウイルス（ COVID-19を引き起こすSARS-CoV-2を含む）のスパイクタンパク質のRBDドメインにしっかりと結合し、スパイクと細胞受容体ACE2との相互作用を阻害するナノボディが最近特定されました[ 51 ] [ 9 ]

様々な高病原性ヒトコロナウイルス（HPhCoV）による感染の予防と治療に、様々な単一ドメイン抗体（ナノボディ）を応用することが報告されている。SARS-CoV-2および類似ウイルスに結合して中和するためのナノボディの展開の可能性、有効性、そして課題が最近注目されている。[ 52 ]

ナガナ症の最も一般的な原因の一つであるトリパノソーマ・ブルーセイ（Trypanosoma brucei brucei）は、sdAbsの標的となり得る。Stijlemansら（2004）は、ウサギとラクダから、ファージを用いて脊椎動物の免疫系に可変性表面糖タンパク質抗原を提示することで、効果的なsdAbsを誘導することに成功した。将来的には、これらの治療法は、自然抗体のサイズが大きいために現在到達できない部位に到達することで、自然抗体を超えるものとなるだろう。[ 53 ]

参考文献

  1. ^ a b Harmsen MM, De Haard HJ (2007年11月). 「ラクダ科動物におけるシングルドメイン抗体フラグメントの特性、製造、および応用」 .応用微生物学およびバイオテクノロジー. 77 ( 1): 13– 22. doi : 10.1007/s00253-007-1142-2 . PMC  2039825. PMID  17704915 .
  2. ^ English H, Hong J, Ho M (2020年1月). 「古代種が現代治療薬を提供する：サメV NAR単一ドメイン抗体配列、ファージライブラリー、および潜在的な臨床応用に関する最新情報」 . Antibody Therapeutics . 3 (1): 1– 9. doi : 10.1093/abt / tbaa001 . PMC 7034638. PMID 32118195 .  
  3. ^ Möller A, Pion E, Narayan V, Ball KL (2010年12月). 「多機能性（Mf1）ドメインへのナノボディによるインターフェロン調節因子1の細胞内活性化」 . The Journal of Biological Chemistry . 285 (49): 38348– 38361. doi : 10.1074/ jbc.M110.149476 . PMC 2992268. PMID 20817723 .  
  4. ^ Ghannam A, Kumari S, Muyldermans S, Abbady AQ (2015年3月). 「ソラマメ斑紋ウイルスに対する高親和性ラクダ科動物ナノボディ：植物のウイルス抵抗性を免疫調節する有望なツール」. Plant Molecular Biology . 87 ( 4–5 ): 355– 369. doi : 10.1007/s11103-015-0282-5 . PMID 25648551. S2CID 17578111 .  
  5. ^ 「ナノボディが癌治療の新時代を告げる」メディカルニュース、2004年5月12日。
  6. ^ 「Pipeline」 . Ablynx . 2010年1月20日閲覧。
  7. ^ギル、ヴィクトリア（2021年9月22日） 「新型コロナウイルス：ラマによる免疫療法に期待」BBCニュース。
  8. ^ a b Buffington J, Duan Z, Kwon HJ, Hong J, Li D, Feng M, et al. (2023年6月). 「 SARS-CoV-2のスパイクS2サブユニットを標的とするコクゾウリムシV NARシングルドメイン抗体の同定」 . FASEB Journal . 37 (6): e22973. doi : 10.1096/ fj.202202099RR . PMC 10715488. PMID 37191949. S2CID 258717083 .   
  9. ^ a b c d Hong J, Kwon HJ, Cachau R, Chen CZ, Butay KJ, Duan Z, et al. (2022年5月). 「ヒトコブラクダのナノボディがSARS-CoV-2変異体を広く中和する」 . Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America . 119 (18) e2201433119. Bibcode : 2022PNAS..11901433H . doi : 10.1073 / pnas.2201433119 . PMC 9170159. PMID 35476528 .  
  10. ^ a b Dolk E, van der Vaart M, Lutje Hulsik D, Vriend G, de Haard H, Spinelli S, et al. (2005年1月). 「シャンプーにおけるファージディスプレイによるふけ予防のためのラマ抗体断片の単離」 .応用環境微生物学. 71 (1): 442– 450. Bibcode : 2005ApEnM..71..442D . doi : 10.1128/AEM.71.1.442-450.2005 . PMC 544197. PMID 15640220 .  
  11. ^ a b Stanfield RL, Dooley H, Flajnik MF, Wilson IA (2004年9月). 「リゾチームと複合体を形成したサメのシングルドメイン抗体V領域の結晶構造」 . Science . 305 (5691): 1770– 1773. Bibcode : 2004Sci...305.1770S . doi : 10.1126/science.11 ​​01148. PMID 15319492. S2CID 25137728 .  
  12. ^ van der Linden RH, Frenken LG, de Geus B, Harmsen MM, Ruuls RC, Stok W, et al. (1999年4月). 「ラマVHH抗体フラグメントとマウスモノクローナル抗体の物理的化学的特性の比較」. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Protein Structure and Molecular Enzymology . 1431 (1): 37– 46. doi : 10.1016/S0167-4838(99)00030-8 . PMID 10209277 . 
  13. ^ハルムセン MM、ファン ソルト CB、ホーゲンドールン A、ファン ザイダーフェルト FG、ニーウォルト TA、ファン デル ミューレン J (2005 年 11 月)。 「大腸菌 F4 線毛特異的ラマ単一ドメイン抗体フラグメントは、インビトロで細菌の付着を効果的に阻害しますが、下痢に対する防御力は不十分です。」獣医微生物学。111 ( 1–2 ): 89–98 .土井: 10.1016/j.vetmic.2005.09.005。PMID 16221532。 
  14. ^ a bハームセン MM、ファン ゾルト CB、ファン ザイデルフェルト＝ファン ベンメル AM、ニーウォルド TA、ファン ザイデルフェルト FG (2006 年 9 月)。 「経口免疫療法のためのタンパク質分解的に安定なラマ単一ドメイン抗体フラグメントの選択と最適化」。応用微生物学とバイオテクノロジー。72 (3): 544–551 .土井: 10.1007/s00253-005-0300-7。PMID 16450109。S2CID 2319210。  
  15. ^ a b c d Ho M (2018年6月). 「就任論説：魔法の弾丸を探して」 . Antibody Therapeutics . 1 (1): 1– 5. doi : 10.1093/abt/tby001 . PMC 6086361. PMID 30101214 .  
  16. ^ Desmyter A, Transue TR, Ghahroudi MA, Thi MH, Poortmans F, Hamers R, et al. (1996年9月). 「ラクダ由来の単一ドメインVH抗体断片とリゾチームとの複合体の結晶構造」. Nature Structural Biology . 3 (9): 803– 811. doi : 10.1038/nsb0996-803 . PMID 8784355. S2CID 10419927 .  
  17. ^ a b Feng M, Bian H, Wu X, Fu T, Fu Y, Hong J, et al. (2019年1月). 「未処理テンジクザメ6匹由来の大規模ファージディスプレイV NARシングルドメイン抗体ライブラリーの構築と次世代シーケンシング解析」 . Antibody Therapeutics . 2 (1): 1– 11. doi : 10.1093/abt / tby011 . PMC 6312525. PMID 30627698 .  
  18. ^ a b Li N, Quan A, Li D, Pan J, Ren H, Hoeltzel G, et al. (2023年4月). 「CD28膜貫通ドメインを有するIgG4ヒンジは、膵臓がんにおいてGPC1の膜遠位エピトープを標的とするV H HベースCAR T細胞を改善する」 . Nature Communications . 14 (1): 1986. Bibcode : 2023NatCo..14.1986L . doi : 10.1038/ s41467-023-37616-4 . PMC 10082787. PMID 37031249 .  
  19. ^ Arbabi Ghahroudi M, Desmyter A, Wyns L, Hamers R, Muyldermans S (1997年9月). 「ラクダ重鎖抗体からの単一ドメイン抗体断片の選択と同定」 . FEBS Letters . 414 (3): 521– 526. doi : 10.1016/S0014-5793(97)01062-4 . PMID 9323027 . 
  20. ^ Li D, English H, Hong J, Liang T, Merlino G, Day CP, Ho M (2022年3月). 「乳がんおよび肝がんの治療におけるPD-L1標的サメV NARシングルドメインCAR-T細胞戦略の新規開発」. Molecular Therapy Oncolytics . 24 : 849– 863. doi : 10.1016/j.omto.2022.02.015 . PMC 8917269. PMID 35317524 .  
  21. ^ Li D, Wang R, Liang T, Ren H, Park C, Tai CH, 他 (2023年9月). 「ラクダナノボディを用いたB7-H3 CAR-T細胞は大型固形腫瘍に対して高い有効性を示す」 . Nature Communications . 14 (1): 5920. Bibcode : 2023NatCo..14.5920L . doi : 10.1038/s41467-023-41631- w . PMC 10517151. PMID 37739951 .  
  22. ^ Zhang YF, Sun Y, Hong J, Ho M (2023年1月). 「CDRグラフティングを用いたShark V NARシングルドメイン抗体のヒト化」 . Current Protocols . 3 (1) e630. doi : 10.1002 / cpz1.630 . PMC 9813873. PMID 36594750 .  
  23. ^ Ward ES, Güssow D, Griffiths AD, Jones PT, Winter G (1989年10月). 「大腸菌から分泌される単一免疫グロブリン可変ドメインのレパートリーの結合活性」. Nature . 341 ( 6242): 544– 546. Bibcode : 1989Natur.341..544W . doi : 10.1038/341544a0 . PMID 2677748. S2CID 4329440 .  
  24. ^ a b Feng R, Wang R, Hong J, Dower CM, Croix BS, Ho M (2020年1月). 「タンパク質免疫化およびファージディスプレイ法によるB7-H3に対するウサギシングルドメイン抗体の単離」 . Antibody Therapeutics . 3 (1): 10– 17. doi : 10.1093/abt/tbaa002 . PMC 7052794. PMID 32166218 .  
  25. ^ a b c Feng M, Gao W, Wang R, Chen W, Man YG, Figg WD, et al. (2013年3月). 「肝細胞癌におけるコンフォメーション特異的シングルドメイン抗体によるグリピカン3の治療標的化」 . Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America . 110 (12): E1083– E1091. Bibcode : 2013PNAS..110E1083F . doi : 10.1073 / pnas.1217868110 . PMC 3607002. PMID 23471984 .  
  26. ^ Holt LJ, Herring C, Jespers LS, Woolven BP, Tomlinson IM (2003年11月). 「ドメイン抗体：治療のためのタンパク質」. Trends in Biotechnology 21 ( 11): 484– 490. doi : 10.1016/j.tibtech.2003.08.007 . PMID 14573361 . 
  27. ^ Borrebaeck CA, Ohlin M (2002年12月). 「自然を超えた抗体の進化」. Nature Biotechnology . 20 (12): 1189– 1190. doi : 10.1038/nbt1202-1189 . PMID 12454662 . S2CID 7937915 .  
  28. ^ a b Tang Z, Feng M, Gao W, Phung Y, Chen W, Chaudhary A, et al. (2013年4月). 「ヒト単一ドメイン抗体は、がん細胞表面に近いメソテリンのエピトープを標的として強力な抗腫瘍活性を誘導する」 . Molecular Cancer Therapeutics . 12 (4): 416– 426. doi : 10.1158 / 1535-7163.MCT-12-0731 . PMC 3624043. PMID 23371858 .  
  29. ^ Li N, Fu H, Hewitt SM, Dimitrov DS, Ho M (2017年8月). 「神経芽腫におけるグリピカン-2を標的とした単一ドメイン抗体ベースのキメラ抗原受容体および免疫毒素による治​​療」 .米国科学アカデミー紀要. 114 (32): E6623– E6631. Bibcode : 2017PNAS..114E6623L . doi : 10.1073/ pnas.1706055114 . PMC 5559039. PMID 28739923 .  
  30. ^ a b Gao W, Tang Z, Zhang YF, Feng M, Qian M, Dimitrov DS, Ho M (2015年3月). 「グリピカン3を標的とした免疫毒素は、Wntシグナル伝達とタンパク質合成の二重阻害を介して肝臓癌を退縮させる」 . Nature Communications . 6 : 6536. Bibcode : 2015NatCo...6.6536G . doi : 10.1038/ncomms7536 . PMC 4357278. PMID 25758784 .  
  31. ^ Wang C, Gao W, Feng M, Pastan I, Ho M (2017年5月). 「肝癌治療におけるグリピカン-3を標的とした免疫毒素HN3-mPE24の構築」 . Oncotarget . 8 (20): 32450– 32460. doi : 10.18632/oncotarget.10592 . PMC 5464801. PMID 27419635 .  
  32. ^ Fleming BD, Urban DJ, Hall MD, Longerich T, Greten TF, Pastan I, Ho M (2020年5月). 「改変抗GPC3免疫毒素HN3-ABD-T20は、血清の長期滞留を通じてマウス肝癌異種移植における腫瘍退縮を引き起こす」 . Hepatology . 71 (5): 1696– 1711. doi : 10.1002/hep.30949 . PMC 7069773. PMID 31520528 .  
  33. ^ Kolluri A, Li D, Li N, Duan Z, Roberts LR, Ho M (2023年2月). 「グリピカン3を標的としたヒトVHベースキメラ抗原受容体T細胞は、肝細胞癌の前臨床モデルにおいて腫瘍を除去する」 . Hepatology Communications . 7 (2) e0022. doi : 10.1097/HC9.0000000000000022 . PMC 9851680. PMID 36691969 .  
  34. ^ Li N, Wei L, Liu X, Bai H, Ye Y, Li D, 他 (2019年10月). 「グリピカン3のFrizzled様システインリッチドメインはWnt結合を媒介し、マウスの肝細胞癌の腫瘍増殖を制御する」 . Hepatology . 70 (4): 1231– 1245. doi : 10.1002/hep.30646 . PMC 6783318. PMID 30963603 .  
  35. ^ Muyldermans S (2013). 「ナノボディ：天然シングルドメイン抗体」. Annual Review of Biochemistry . 82 : 775– 797. doi : 10.1146/annurev-biochem-063011-092449 . PMID 23495938 . 
  36. ^ a b Gulati S、Jin H、Masuho I、Orban T、Cai Y、Pardon E、他。 （2018年5月）。「選択的ナノボディ阻害剤を使用した、G タンパク質レベルでの G タンパク質共役受容体シグナル伝達の標的化」。ネイチャーコミュニケーションズ。9 (1): 1996。Bibcode : 2018NatCo...9.1996G。土井: 10.1038/s41467-018-04432-0。PMC 5959942。PMID 29777099。  
  37. ^ Rothbauer U, Zolghadr K, Tillib S, Nowak D, Schermelleh L, Gahl A, et al. (2006年11月). 「蛍光ナノボディを用いた生細胞における抗原の標的化と追跡」. Nature Methods . 3 (11): 887– 889. doi : 10.1038/nmeth953 . PMID 17060912. S2CID 29985078 .  
  38. ^ Rothbauer U, Zolghadr K, Muyldermans S, Schepers A, Cardoso MC, Leonhardt H (2008年2月). 「蛍光融合タンパク質を用いた生化学および機能研究のための多用途ナノトラップ」 . Molecular & Cellular Proteomics . 7 (2): 282– 289. doi : 10.1074/mcp.M700342-MCP200 . PMID 17951627 . 
  39. ^ Ries J, Kaplan C, Platonova E, Eghlidi H, Ewers H (2012年6月). 「ナノボディを用いたGFPベースの超解像顕微鏡のためのシンプルで汎用性の高い方法」. Nature Methods . 9 (6): 582– 584. doi : 10.1038/nmeth.1991 . PMID 22543348. S2CID 12190938 .  
  40. ^ Fang T, Lu X, Berger D, Gmeiner C, Cho J, Schalek R, 他 (2018年12月). 「超微細構造の保存を伴う相関光顕微鏡法と電子顕微鏡法のためのナノボディ免疫染色」 . Nature Methods . 15 (12): 1029– 1032. doi : 10.1038/s41592-018-0177-x . PMC 6405223. PMID 30397326 .  
  41. ^ Saerens D, Frederix F, Reekmans G, Conrath K, Jans K, Brys L, 他 (2005年12月). 「ラクダ由来のシングルドメイン抗体のエンジニアリングとヒト前立腺特異抗原センシングのための固定化化学」.分析化学. 77 (23): 7547– 7555. doi : 10.1021/ac051092j . PMID 16316161 . 
  42. ^小出 誠 (2009年8月). 「組換え結晶化シャペロンのエンジニアリング」 . Current Opinion in Structural Biology . 19 (4): 449– 457. doi : 10.1016/j.sbi.2009.04.008 . PMC 2736338. PMID 19477632 .  
  43. ^イバニェス・LI、デ・フィレット・M、ハルトバーグ・A、ヴェリップス・T、テンパートン・N、ワイス・RA、他。 （2011年4月）。「インビトロ中和活性を有するナノボディは、H5N1 インフルエンザウイルス感染からマウスを保護します。 」感染症ジャーナル。203 (8): 1063–1072。doi : 10.1093 / infdis/jiq168。hdl : 1854/LU-1212323。PMID 21450996。 
  44. ^ Hussack G, Arbabi-Ghahroudi M, van Faassen H, Songer JG, Ng KK, MacKenzie R, Tanha J (2011年3月). 「細胞受容体結合ドメインを標的とするシングルドメイン抗体によるクロストリジウム・ディフィシル毒素Aの中和」 . The Journal of Biological Chemistry . 286 (11): 8961– 8976. doi : 10.1074/jbc.M110.198754 . PMC 3058971. PMID 21216961 .  
  45. ^ Fang T, Duarte JN, Ling J, Li Z, Guzman JS, Ploegh HL (2016年2月). 「構造的に定義されたαMHC-IIナノボディ-薬物複合体：B細胞リンパ腫の治療およびイメージングシステム」 . Angewandte Chemie . 55 (7): 2416– 2420. doi : 10.1002/anie.201509432 . PMC 4820396. PMID 26840214 .  
  46. ^ Fang T, Van Elssen CH, Duarte JN, Guzman JS, Chahal JS, Ling J, Ploegh HL (2017年8月). 「抗クラスII MHC VHHによる標的抗原送達は、集中的なαMUC1(Tn)免疫を誘発する」 . Chemical Science . 8 (8): 5591– 5597. doi : 10.1039/c7sc00446j . PMC 5618788. PMID 28970938 .  
  47. ^ a b "ナノボディ" .ナノボディ.org。 2006年。
  48. ^ Van de Broek B, Devoogdt N, D'Hollander A, Gijs HL, Jans K, Lagae L, et al. (2011年6月). 「光熱療法のためのナノボディ結合分岐金ナノ粒子による特異的細胞標的化」. ACS Nano . 5 (6): 4319– 4328. doi : 10.1021/nn1023363 . PMID 21609027 . 
  49. ^ 「Ablynx社、ALX-0081（抗VWF薬）を対象としたNANOBODY®フェーズI試験の中間結果を発表」 Bio-Medicine.org、2007年7月2日。
  50. ^ ClinicalTrials.govの「高リスク経皮的冠動脈インターベンション（PCI）患者におけるALX-0081とGPIIb/IIIa阻害剤の比較試験」の臨床試験番号NCT01020383
  51. ^ Wrapp D, De Vlieger D, Corbett KS, Torres GM, Wang N, Van Breedam W, et al. (2020年5月). 「単一ドメインラクダ科動物抗体によるベータコロナウイルスの強力な中和作用の構造的基盤」 . Cell . 181 ( 5): 1004–1015.e15. doi : 10.1016/j.cell.2020.04.031 . PMC 7199733. PMID 32375025 .  
  52. ^ Konwarh R (2020年6月23日). 「ナノボディ：新型コロナウイルス（SARS-CoV-2）に対する中和抗体の範囲拡大の展望」 . Frontiers in Immunology . 11 : 1531. doi : 10.3389/fimmu.2020.01531 . PMC 7324746. PMID 32655584 .  
  53. ^ Muyldermans S (2013-06-02). 「ナノボディ：天然シングルドメイン抗体」. Annual Review of Biochemistry . 82 (1). Annual Reviews : 775– 797. doi : 10.1146/annurev-biochem-063011-092449 . PMID 23495938. p. 788:さらに… 
「 https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Single-domain_antibody&oldid=1322150998」より取得