TimeSTAMPタンパク質標識

TimeSTAMP (タンパク質の年齢測定のための時間特定タグ) は、 2008 年にカリフォルニア大学サンディエゴ校Roger Tsien研究室のMichael Z. Linによって発明された技術です。これは、遺伝子タグが付けられたタンパク質の新しく合成されたコピーを特異的にラベル付けできる技術です。

TimeSTAMP技術の原理

TimeSTAMP法は、薬剤依存的にエピトープタグが保存されることを利用して、新たに合成されたタンパク質を標識する技術である[ 1 ]。

この技術では、低分子薬剤を一度投与した後に合成される全てのタンパク質にタグを付与します。この目的を達成するために、特異的なプロテアーゼ活性を組み込むことで、エピトープタグに自己除去挙動を付与します。次に、対応するプロテアーゼ阻害剤を用いてタグの除去を阻害します。その結果、阻害剤の適用後に合成されたタンパク質のみがタグ化されます。

TimeSTAMPのその後の変種は、薬剤依存的に蛍光タンパク質タグを保存することを可能にする。[ 2 ]

TimeSTAMP技術の応用

TimeSTAMP技術は、厚い組織や無傷の動物でも、新しく合成された目的のタンパク質を時間的に制御して標識し、高感度で特異的な検出を提供するため、生きた動物における新しく合成されたタンパク質の分布を研究することができる。

参考文献

  1. ^ Lin, MZ; Glenn, JS; Tsien, RY (2008). 「細胞および動物体内で新たに合成されたタンパク質可視化するための薬剤制御型タグ」 .米国科学アカデミー紀要. 105 (22): 7744–9 . doi : 10.1073/pnas.0803060105 . PMC  2402386. PMID 18511556  .
  2. ^ Butko, MT; Yang, J.; Geng, Y.; Kim, HJ; Jeon, NL; Shu, X.; MacKey, MR; Ellisman, MH; Tsien, RY; Lin, MZ (2012). 「蛍光および光酸化TimeSTAMPタグは光学顕微鏡および電子顕微鏡におけるタンパク質の運命を追跡する」 . Nature Neuroscience . 15 (12): 1742–51 . doi : 10.1038/nn.3246 . PMC 3509268. PMID 23103964 .