浮力密度遠心分離

浮遊密度遠心分離法を用いて分離された犬パルボウイルスの電子顕微鏡画像

浮力密度遠心分離(等密度遠心分離または平衡密度勾配遠心分離とも呼ばれる)は、浮力の概念を利用して、溶液中の分子を密度の違いによって分離します。

実装

歴史的には塩化セシウム(CsCl)溶液がよく使用されていましたが、より一般的にはショ糖またはパーコール溶液が密度勾配溶液として使用されています。この用途では、高密度でありながら比較的低い粘度を持つ溶液が必要であり、CsClは水への溶解度が高く、Csの質量が大きいため密度が高く、CsCl溶液は粘度が低く安定性が高いため適しています。[ 1 ]

サンプルを溶液の上に置き、チューブを非常に高速で長時間(時には数日間)回転させます。CsCl分子は底部に向かって密集するため、密度(およびCsCl濃度)の異なる層が連続的に勾配を形成します。元の溶液の密度はほぼ同じであるため、サンプルの密度とCsClの密度が一致する層まで移動し、その層で鮮明で特徴的なバンドを形成します。

塩化セシウム(CsCl)溶液と2種類の形態学的タイプのロタウイルス。100 gaで遠心分離すると、CsCl溶液中に密度勾配が形成され、ウイルス粒子は密度に応じて分離します。

同位体分離

この方法は非常に鋭敏に分子を分離し、異なる分子同位体同士を分離することさえ可能である。[ 2 ]この方法はメセルソン・スタールの実験で利用されている。

DNA分離

DNAの大部分の浮力密度は1.7g/cm 3 [ 3 ]で、これは6M CsCl溶液の密度に等しい。DNAの浮力密度はGC含有量によって変化する。「サテライトDNA」とは、主成分DNAの上(A+Tに富む)または下(G+Cに富む)に浮かぶ、異なる塩基組成を持つ反復DNA配列の小さなバンドを指す。

参照

参考文献

  1. ^バート、リチャード・O. (2000年12月4日). 「セシウムとセシウム化合物」 .カーク・オスマー化学技術百科事典. doi : 10.1002/0471238961.0305190902211820.a01 . ISBN 978-0-471-48494-3
  2. ^ Dumont, Marc G.; Murrell, J. Colin (2005年6月). 「安定同位体プローブ法 ― 微生物アイデンティティと機能の関連づけ」 . Nature Reviews Microbiology . 3 (6): 499– 504. doi : 10.1038/nrmicro1162 . ISSN 1740-1534 . PMID 15886694. S2CID 24051877 .   
  3. ^アリーギ、フランシス E.マンデル、マンリー。バーゲンダール、ジャネット。スー、TC (1970 年 6 月)。 「哺乳類の浮遊する DNA 密度」。生化学遺伝学4 (3): 367–376土井: 10.1007/BF00485753PMID 4991030 

さらに読む

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