凍結切片法は、標本の迅速な顕微鏡分析を行う病理 学実験室における手法です。腫瘍外科手術で最も多く用いられています。^{[ 1 ]}この手法の専門用語は「凍結切片法」です。凍結した組織の薄い塊を冷間切断するミクロトーム装置は「クライオトーム」と呼ばれます。^{[ 2 ]}

凍結切片で作製されたスライドの品質は、ホルマリン固定パラフィン包埋組織処理よりも劣ります。多くの場合、診断は可能ですが、より正確な診断のためには、多くの状況において固定組織処理が好まれます。

術中コンサルテーションとは、病理医による手術介入全般を指す名称であり、凍結切片だけでなく、標本の肉眼的評価、標本から採取した細胞診標本の検査（例：捺印）、特別な研究（例：分子病理学的手法、フローサイトメトリー）のための標本の小分けなどが含まれます。病理医による報告は、多くの場合「良性」または「悪性」の診断に限定され、インターコムを介して執刀医に伝えられます。悪性腫瘍が確認された手術の場合、病理医の主な目的は、切除縁に残存癌がないかどうか、または切除縁に残存癌が存在するかどうかを執刀医に伝えることです。切除方法は、通常、ブレッドローフィング法で行われます。しかし、マージンコントロール手術（CCPDMA ）は、モーズ手術を含むさまざまな組織切片作製法を用いて行うことができます。

今日、医療検査室で行われている凍結切片法は、ルイス・B・ウィルソンが1905年に発表した記述に基づいています。ウィルソンは、外科医でありメイヨー・クリニックの創設者の一人でもあるウィリアム・メイヨーの要請を受け、以前の報告に基づいてこの手法を開発しました。^{[ 3 ]}ボルチモアのジョンズ・ホプキンス病院のトーマス・S・カレンによる以前の報告でも凍結切片法が用いられていましたが、ホルマリン固定後のものに限られていました。また、同じくホプキンス病院の病理学者ウィリアム・ウェルチもカレンの手法を実験しましたが、臨床的な成果は得られませんでした。そのため、ウィルソンは真にこの手法の先駆者として広く認められています（Gal & Cagle, 2005）。^{[ 4 ]}

凍結切片作製に不可欠な器具はクライオスタットです。これは本質的に冷凍庫に収納されたミクロトームです。ミクロトームは、1マイクロメートルという薄さまで切片を作製できる、非常に精密な「デリカテッセン」スライサーに例えることができます。通常の組織切片は5～10マイクロメートルの厚さで作製されます。手術標本は金属製の組織ディスクに載せられ、チャックに固定された後、約-20～-30℃で急速凍結されます。標本はゲル状の包埋剤（通常はポリエチレングリコールとポリビニルアルコールからなるOCT）に包埋されます。この化合物は様々な名称で知られており、凍結すると凍結組織と同じ密度になります。この温度では、ほとんどの組織は石のように硬くなります。脂肪や脂質を多く含む組織の場合は、通常、より低い温度が必要です。組織ごとに処理に適した温度があります。その後、クライオスタットのミクロトーム部分で凍結切片を作成し、スライドガラス上に採取して染色します（通常はヘマトキシリン・エオシン染色、H&E染色）。標本の作製は従来の組織学的手法よりもはるかに迅速です（約10分 vs. 16時間）。しかし、切片の技術的品質ははるかに低くなります。研究室全体は9平方フィート（0.84 m ² ）未満のスペースしか占有せず、標準的なワックス包埋標本研究室と比較して換気は最小限で済みます。 ^[要出典]

凍結切開術の手順:

• 
  試験片を 1 つまたは複数のチャックに取り付けます。
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  標本を包埋剤で覆う
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  導体を塗布する（横向きに立てる必要がある薄い試料の場合を除く）
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  凍結スプレーがあれば使用して凍結を早める
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  チャックプレートの下まで達した埋め込み媒体を切断する
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  クライオトームのチャックを固定し、関心のある組織表面全体が露出するまで比較的厚い切片を切断する
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  標本が折れ曲がらないように、切片を押さえながら標本を刃の上へ進める
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  関心のある組織がすべて切片に含まれるまで続ける
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  組織の上にスライドガラスを置きます。

凍結切片法の主な用途は、手術中に組織を検査することです。これには様々な理由があります。モーズ手術においては、これは手術標本のリアルタイムのマージンコントロールを可能にする簡便な方法です。腫瘍が転移していると思われる場合、転移が疑われる部位のサンプルを凍結切片に送り、その正体を確認します。これは、外科医が手術を続行する価値があるかどうかを判断するのに役立ちます。通常、積極的な手術は、患者を治癒させる可能性がある場合にのみ行われます。腫瘍が転移している場合、手術による治癒は期待できず、外科医はより温存的な手術を選択するか、切除を全く行いません。腫瘍を切除したが、切除縁に腫瘍がないかどうか不明な場合は、切除縁を確保するために更なる切除が必要かどうかを判断するために、術中相談が行われます。センチネルリンパ節郭清術では、センチネルリンパ節に腫瘍組織が含まれている場合は更なるリンパ節郭清が求められますが、良性リンパ節の場合はこのような郭清は行われません。^[要出典]

探索的手術の場合、病変の迅速な検査は患者の症状の原因特定に役立つ可能性があります。しかしながら、凍結切片の技術的品質が低いため、病理医の判断には大きな限界があることに留意することが重要です。術中に最終診断が下されることは稀です。^[要出典]

稀に、凍結切片は、従来の組織学的手法では検出されない物質（例えば脂質）の存在を検出するために使用されます。また、ホルマリンで隠蔽された抗原の検出にも使用できます。クライオスタットは、重量36kg未満の小型の携帯型から、重量230kg以上の大型の据置型まで、様々なサイズがあります。組織学的検査室全体を1つの持ち運び可能な箱に収納できるため、凍結切片組織学は原始医学においても有効な手段となります。

2016年に発表されたコクランの系統的レビューでは、卵巣の腫瘍が疑われる手術を受ける女性における凍結切片の診断精度を報告したすべての研究を分析した。レビューでは、凍結切片で明らかに良性か悪性かと判定された腫瘍については、通常の生検で後に確認されたように診断精度は良好であると結論付けた。対照的に、凍結切片診断が境界性腫瘍で、癌を確定も除外もできない場合、診断の精度は低かった。レビューでは、このような不確実な状況では、平均してこれらの女性の5人に1人はその後癌が発見されるため、外科医は2度目の手術の必要性を減らすために、最初の手術時にこのグループの女性に対して追加の手術を行うことを選択する可能性があることを示唆している。^{[ 5 ]}

クライオトームに非常によく似た装置であるウルトラクライオトームは、極薄の組織ブロックを切片化し、透過型電子顕微鏡で観察することができます。ウルトラクライオトームの切片厚は約数十ナノメートルです。組織を包埋することなく超微細構造特性を研究できるため、分子の保存性が向上します。^{[ 6 ]}

• 凍結組織アレイ

• 凍結切片法に関するJAMAの患者向けページ